كيمياء

توفير المذيبات في HPLC


الملخص: احفظ المذيب عن طريق تقليل القطر الداخلي للعمود

تين.

<Seite 4 von 14>


نطاق Elutrope

ال سلسلة elutrope (سلسلة eluotropic) تفرز المذيبات العضوية الأكثر شيوعًا وفقًا لتأثير الشطف (انتقائية الشطف) في الكروماتوغرافيا. تأثير الشطف هو قدرة المذيب على السماح للمادة بالمرور. الترتيب تجريبي ويعتمد على المرحلة الثابتة المستخدمة. ومع ذلك ، فإن سلسلة elutropic ترتبط في الغالب مع سماح المذيبات.

بالنسبة للمادة الممتزة الأكثر شيوعًا في الكروماتوغرافيا ، هلام السيليكا ، هناك السلسلة التالية (زيادة تأثير الشطف):

مستوى قوة الشطف E 0
ن-بنتان 0,00
ن-هكسان 0,00
سيكلوهكسان 0,03
سيكلوبنتان 0,04
رابع كلوريد الكربون 0,14
ثنائي أيزوبروبيل الأثير 0,22
التولوين 0,22
البنزين 0,25
ديثيل الأثير 0,29
ثنائي كلورو ميثان (كلوريد الميثيلين) 0,30
الكلوروفورم 0,31
الأسيتون 0,43
ديوكسان 0,43
تتراهيدروفوران 0,48
MTBE (ثلاثي-بوتيل ميثيل الأثير) 0,48
أسيتات الإيثيل (أسيتات الإيثيل) 0,45
ثنائي ميثيل سلفوكسيد 0,48
الاسيتونتريل 0,5
بيريدين 0,55
2-بروبانول (ايزوبروبانول) 0,60
الإيثانول 0,68
الميثانول 0,73
حمض الاسيتيك
ماء

من القائمة يمكنك أن ترى أن مادة قطبية مثل حمض أسيتيل الساليسيليك تعمل ببطء شديد على عمود هلام السيليكا مع الهكسان ، ولكن بسرعة كبيرة مع الميثانول. بشكل عام ، تُستخدم المذيبات أو مخاليط المذيبات لفصل المواد التي تؤدي إلى سرعة تشغيل سريعة إلى حد ما لمكونات العينة الأكثر إثارة للاهتمام. تؤدي سرعات التشغيل العالية ، مع قيم التردد الراديوي العالية المقابلة في كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة ، بشكل عام إلى نتائج فصل رديئة (قيم التردد الراديوي في TLC أكبر من 0.5 أو 0.6).

عندما يتعلق الأمر بتحديد مرحلة متنقلة مناسبة لكروماتوغرافيا العمود التحضيري من الاختبارات الأولية بمساعدة كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة ، فمن المستحسن مراعاة القاعدة التالية. يجب أن تحتوي مجموعات المواد المهمة والتي يصعب فصلها على قيم Rf في منطقة 0.3. هذا حل وسط جيد من حيث أداء الفصل ومدة الكروماتوغرافيا (if إيزوقراطي ، أي أن تكوين المذيب يظل ثابتًا أثناء الفصل).

يحاول مفهوم سلسلة elutropic ، حيث يتم ترتيب المذيبات وفقًا للقطبية أو السماحية ، اكتشاف خصائصها في الفصل اللوني أ تقليل معلمة واحدة. هذا التبسيط مفيد للغاية في الاعتبار الأول. عندما يتعلق الأمر بتحسين انتقائية الفصل الكروماتوغرافي ، فمن المفيد إلقاء نظرة فاحصة على التفاعلات المحددة بين الجزيئات الفردية (العينة والمذيب والممتزات). على سبيل المثال ، هناك معلمات تميز قدرة جزيئات المذيبات على أنها متقبلات في الروابط الهيدروجينية أو كمانحات. وهذا أيضًا هو السبب الذي يجعل من المنطقي ، في الحالات الدقيقة ، استخدام ثلاثة مذيبات بدلاً من مذيلين للخليط. إذا كان هناك بعد واحد فقط للقطبية ، فسيكون اثنان كافيين.

إنها منافسة بين جزيئات المذيب أو خليط المذيب مع جزيئات مكونات العينة الفردية حول نقاط الالتصاق على مادة الامتصاص. في الكروماتوغرافيا السائلة الكلاسيكية ، يتم استخدام الممتزات التي لها نقاط الالتصاق القطبية (هلام السيليكا ، أكسيد الألومنيوم). تكمن المشكلة في أن جزءًا صغيرًا من نقاط الالتصاق هذه له قطبية أعلى (عند نقاط معينة من فشل الممتزات). يمكن معالجة هذا بالطرق التالية. بدلاً من المذيبات الجافة المتنقلة ، يتم استخدام المذيبات المتنقلة التي تحتوي على محتوى مائي منخفض للغاية. هذا يعطل نقاط الالتصاق التخريبية عالية القطبية (لأنها مشغولة بجزيئات الماء عالية القطبية). لإنتاج مثل هذه المذيبات المتنقلة ، على سبيل المثال ، يمكن خلط المذيبات المتنقلة الجافة والمشبعة بالماء (بنسبة 1 160: 1 أو 3160: 1 اعتمادًا على مادة الامتصاص). لا يُسمح بهذا الإجراء إلا إذا كانت جزيئات العينة غير حساسة للماء إلى حد ما. إذا كانت مخاليط المذيبات تحتوي على مكونات عالية القطبية مثل الإيثانول أو الميثانول ، فإن إضافة الماء عادة ما تكون غير ضرورية.


تذييل

معلومة

آحرون

Avantor® ، إحدى شركات Fortune 500 ، هي شركة تصنيع ومزود عالمي رائد للمنتجات المبتكرة والمواد عالية النقاء والخدمات المخصصة للأدوية الحيوية والرعاية الصحية والمؤسسات الجامعية والعامة والتقنيات المتقدمة والصناعات البحثية. تُستخدم محفظتنا في كل مرحلة تقريبًا من تطبيقات البحث والتطوير والتصنيع الرئيسية في الصناعات التي نعمل فيها. تعد بنيتنا التحتية العالمية الموضوعة استراتيجيًا واحدة من أعظم نقاط قوتنا في تلبية احتياجات عملائنا. يتيح لنا تواجدنا العالمي توفير أكثر من 225000 موقع للعملاء في جميع أنحاء العالم ، ويمنحنا وصولاً مكثفًا إلى مختبرات البحث والعلماء في أكثر من 180 دولة. نضع العلم في حركة لخلق عالم أفضل. يتوفر مزيد من المعلومات على موقع avantorsciences.com أو حسابات LinkedIn و Twitter و Facebook الخاصة بنا.

& نسخ 2021 VWR International، LLC. كل الحقوق محفوظة.
& نسخ 2021 FORTUNE Media IP Limited جميع الحقوق محفوظة. مستخدمة بموجب ترخيص.


  • Eurofins BioTesting Services Nord GmbH
  • هامبورغ
  • 15.06.2021
  • تحليل الأغذية والأعلاف باستخدام طرق الاستزراع الميكروبيولوجي التقليدية والأساليب السريعة (مثل BAX PCR).
  • هامبورغ
  • 15.06.2021

مساعد مختبر الأحياء ، MTLA ، BTA ، عالم الأحياء - مختبر تحليلي روتيني ، العلاج المناعي ، لقاحات الأورام *

  • BioNTech SE
  • ماينز ، راينلاند بالاتينات
  • 16.06.2021
  • معرض الوظائف
  • في مشروعنا الرائد iNeST ، ستخطو قريبًا الخطوة الحاسمة التالية معنا. مع BioNTech ستصبح رائدًا عالميًا في تطوير نوع جديد تمامًا من العلاج المناعي ضد السرطان.
  • ماينز
  • 16.06.2021

كيميائي ، مهندس كيميائي - سلامة المنتج ، الكيمياء التحليلية (f / m / d)

  • abcr GmbH
  • كارلسروه ، بادن فورتمبيرغ
  • 24.06.2021
  • التحدي والموجه نحو المستقبل - مهامك مهمتك الرئيسية هي إنشاء أوراق بيانات السلامة بدعم من النظام وفقًا للوائح REACH. إنهم يدعمونك في تحديد وتقييم السلامة و.
  • كارلسروه
  • 24.06.2021

الكيميائي ، الكيميائي الغذائي ، الكيميائي الحيوي - تطوير الطريقة ، والتحقق من الصحة ، والتحليل (m / f / d)

  • مركز تحليلي Biopharm GmbH برلين
  • برلين
  • 24.06.2021
  • بصفتك كيميائيًا تحليليًا ، فأنت مسؤول بشكل مشترك عن تطوير والتحقق من صحة الأساليب الكروماتوغرافية باستخدام HPLC-UV و GC-FID / MS و LC-MS / MS ، وكذلك عن صيانة مجموعة المعدات والعناية بها وفقًا لـ أنشئت.
  • برلين
  • 24.06.2021

مساعد مختبر الأحياء ، MTA ، BTA ، CTA - الكيمياء الحيوية للبروتين ، التحليلات (m / f / d)

  • Heidelberg Pharma Research GmbH
  • لادنبرج ، بادن فورتمبيرغ
  • 29.06.2021
  • يشتمل العمل على تخطيط وتنفيذ وتقييم التجارب البيوكيميائية لإنتاج وتقييم وتحسين اقترانات الأجسام المضادة والأدوية. ستقوم بتنفيذ أساليب البروتين البيوكيميائية والتحليلية والبيولوجية الخلوية.
  • لادنبرغ
  • 29.06.2021

عالم الأحياء ، عالم الطب الحيوي ، طبيب - علم الدم المناعي ، التحليلات ، التشخيص (ذ / و / ي)

  • معمل د. ويسبلينجهوف
  • كولونيا ، شمال الراين وستفاليا
  • 16.06.2021
  • التوجيه الفردي والمؤهل: ستتلقى دعمًا مستمرًا من زملائك ، وكمبتدئ ، يمكنك تحمل المسؤولية بسرعة. نموذج تكلفة إضافية جذابة: الليل والأحد و.
  • كولونيا
  • 16.06.2021

BTA ، CTA ، مساعد مختبر ، عالم الكيمياء الحيوية - كيمياء البروتين ، التحليلات (m / f / d)

  • Microcoat Biotechnologie GmbH
  • بيرنريد ، بحيرة شتارنبرج ، بافاريا
  • 17.06.2021
  • الإنتاج المستقل لمقارنات البروتين (مثل اتحادات الذهب ، وتقارن الإنزيم) لاستخدامها في الاختبارات التحليلية ، والتحليلات الكيميائية والبيولوجية لمنتجاتنا (الوسيطة) ، والمشاركة في فرق التطوير.
  • برنريد ، بحيرة شتارنبرج
  • 17.06.2021

BTA ، PTA ، CTA ، MTLA - مراقبة الجودة ، التحليل ، المستحضرات الصيدلانية (m / f / d)

  • Minaris Regenerative Medicine GmbH
  • Ottobrunn بالقرب من ميونيخ
  • 30.06.2021
  • تنفيذ التحليل (الضوابط في العملية ، اختبارات الإطلاق والثبات) للأدوية القائمة على الخلايا (ATMP) وتوثيقها ، وفقًا للمتطلبات التنظيمية.
  • Ottobrunn بالقرب من ميونيخ
  • 30.06.2021

مساعد مختبر الأحياء ، MTA ، BTA ، PTA - الإنتاج والتحليل والتخزين المبرد (m / f / d)

  • CMT Cellex Manufacturing Transports and Logistics GmbH
  • كولونيا ، شمال الراين وستفاليا
  • 23.06.2021
  • التنفيذ المستقل لأنشطة التصنيع GMP في الغرف النظيفة من الفئة D إلى A. ودعم إنشاء تعليمات العمل القياسية.
  • كولونيا
  • 23.06.2021

CTA ، فني كيميائي ، BTA ، فني مختبر - أليغنوكليوتيدات مراقبة الجودة ، التحليلات (m / f / d)

  • BioSpring GmbH
  • فرانكفورت أم ماين ، هيس
  • 17.06.2021
  • معرض الوظائف
  • كجزء من مراقبة جودة قليل النوكليوتيدات ، فأنت مسؤول عن تحضير العينات وتحليلها في ظل ظروف ممارسات التصنيع الجيدة.
  • فرانكفورت أم ماين
  • 17.06.2021

BTA ، CTA ، MTA ، PTA ، مساعد مختبر - الكيمياء الحيوية للبروتين ، التحليلات (m / f / d)

  • ChromoTek GmbH
  • Martinsried / Planegg
  • 30.06.2021
  • تقنيات العمل البيوكيميائية والمناعة للبروتين ، على سبيل المثال SDS-PAGE ، و Western Blotting ، و ELISA ، والترسيب المناعي.
  • Martinsried / Planegg
  • 30.06.2021

كيميائي ، فيزيائي ، عالم الكيمياء الحيوية كمدير منتج - ICP-OES ، التحليل الكيميائي (m / f / d)

  • أناليتيك جينا إيه جي
  • جينا ، تورينجيا
  • 30.06.2021
  • أنت مسؤول عن التطوير الاستراتيجي (الإضافي) لمنتجات Analytik-Jena في منطقة ICP-OES: تتضمن المهمة كلاً من التعريف الاستراتيجي للأسواق الحالية ومتطلبات العملاء الحالية بالإضافة إلى.
  • جينا
  • 30.06.2021

مهندس هندسة كهربائية ، ميكاترونكس ، فني كمهندس تطوير - تحليلات مفيدة لأنظمة الأجهزة (m / f / d)

  • SPECTRO Analytical Instruments GmbH
  • كليف ، شمال الراين وستفاليا
  • 21.06.2021
  • تطوير أنظمة الأجهزة لتحليل الأدوات ، المشاركة في تطوير الجهاز ، من بناء النموذج الأولي إلى إنتاج السلسلة ، ونقل التطورات الجديدة المحددة إلى السلسلة الحالية ، إذا لزم الأمر ، افتراض إدارة المشروع.
  • كليف
  • 21.06.2021

فني مختبر ، فني كيميائي ، BTA ، MTA ، CTA - تحليل العلاجات الفيروسية (m / f / d)

  • Boehringer Ingelheim Therapeutics GmbH سابقًا Labour Dr. Merk & Kollegen GmbH
  • Ochsenhausen ، بادن فورتمبيرغ
  • 21.06.2021
  • بعد تدريب شامل ومنهجي ، ستتولى مهام في مجال التحليل الروتيني في سياق إنتاج العلاجات الفيروسية فيما يتعلق بضوابط العملية وإصدارات المنتجات. إلى جوهر مجموعة الأساليب.
  • أوشسينهاوزن
  • 21.06.2021

مساعد مختبر كيميائي / CTA أو بكالوريوس العلوم (m / f / d) في مجال التحليل الصيدلاني (cGMP)

  • معمل A&M STABTEST للتحليل واختبار الاستقرار GmbH
  • ماينز ، راينلاند بالاتينات
  • 11.06.2021
  • التحليل الكمي للمستحضرات الصيدلانية بتقنيات تحليل مختلفة (مثل HPLC / UPLC ، تحليل الاستنشاق ، الذوبان والعديد من التقنيات الأخرى للتحليل الآلي) تأهيل وصيانة التحليل.
  • ماينز
  • 11.06.2021

فنيو المختبرات (m / f / d) لتحليل LC-MS / MS في مياه المصفوفة بدوام كامل

  • معهد يوروفينز Jäger GmbH
  • توبنغن ، بادن فورتمبيرغ
  • 28.06.2021
  • تقييم التحليلات عبر مجموعة الأساليب بأكملها في مجال تحليلات LC-MS / MS في Eurofins Institut Jäger GmbH ونقل البيانات إلى نظام LIMS الداخلي ، وتنسيق إشغال الجهاز ، وتنفيذ الأمر ذي الصلة.
  • توبنغن
  • 28.06.2021

لقد نجحت في حفظ بريد العمل الخاص بك

بعد تأكيد عنوان بريدك الإلكتروني ، ستتلقى عروض عمل مخصصة مجانًا.

وظائف في العلوم والهندسة - تحليلات

تؤدي الطريقة الدقيقة للعمل إلى النجاح - يستخدم العلماء في التحليلات مجموعة متنوعة من الأساليب لتحليل المواد والمركبات حتى يتمكنوا من تسمية المكونات الصغيرة

يكتسب الخريجون في العلوم الطبيعية مثل البيولوجيا والكيمياء والصيدلة وكذلك المهندسون في التكنولوجيا الصيدلانية والكيميائية المعرفة الأساسية بالطرق التحليلية أثناء دراستهم. غالبًا ما يجد أولئك الذين يستمتعون بالعمل المخبري والنهج الدقيق أنفسهم في مختبر التحليل. يجب ألا يتسبب الوزن الدقيق للمواد المراد تحليلها والإعداد الصحيح للحلول والفهم الفني الأساسي للمعدات التي سيتم استخدامها في حدوث أي مشاكل للمحللين الناشئين.

يجد العلماء والمهندسون والمساعدون الفنيون عروض عمل مثيرة للاهتمام في الجامعات ولكن أيضًا بشكل متزايد في الصناعة. في صناعة الأدوية ، صناعة الأغذية ، في تصنيع المنتجات الطبية والأعلاف الحيوانية. في كل هذه المجالات وكذلك في إنتاج الأسمدة وصناعة مستحضرات التجميل ، هناك طلب على الخريجين في مجال التحليلات.
في البحث ، يُطلب من المحللين تحديد المنتجات والمركبات في مجال علم البروتينات والجينوميات والتوليف العضوي وغير العضوي. يتم استخدام مجموعة متنوعة من الأساليب لهذا الغرض. هناك حاجة أيضًا إلى تقنيات مختلفة لتحديد ما إذا كان المركب موجودًا (التحليل النوعي) وكمية المادة الموجودة (التحليل الكمي).

مجموعة من الأساليب في التحليلات

  • التحليل الطيفي الشامل
  • مطيافية الكتروسبراي
  • HPLC
  • هلام الكهربائي
  • لطخة غربية
  • لطخة الشمالية
  • لطخة جنوبية
  • هجوم العمالقه
  • مالدي توف
  • تحليل حيود الأشعة السينية
  • مطيافية الأشعة تحت الحمراء
  • التحليل الطيفي بالرنين المغناطيسي النووي
  • رامان الطيفي
  • نثر النيوترونات
  • تفاعلات الكشف الكيميائي المختلفة

مجالات مسؤولية المحللين

لا يشير مصطلح المحلل إلى تدريب منفصل أو مهنة دراسية. يمكن للخريجين في مختلف العلوم الطبيعية وكذلك المساعدين التقنيين الكيميائي أو الصيدلاني أو البيولوجي (CTA ، PTA ، BTA) بالإضافة إلى مساعدي المختبرات العمل في تحليل المركبات في مجموعة متنوعة من الصناعات.

صاحب عمل مثير للاهتمام للمحللين

بالإضافة إلى جميع الصناعات التي يتعين عليها إثبات ضمان جودة إنتاجها ، مثل صناعة الأدوية وصناعة الأغذية والأعلاف ، هناك أيضًا شركات تدير مختبرات تحليلية خاصة بها من أجل الحفاظ على مستوى منتجاتها عالية و لاستبعاد التلوث. يتم إجراء تحليل محدد قانونيًا للمنتجات النهائية خارجيًا بواسطة مختبرات مستقلة. هناك العديد من مفاهيم صاحب العمل المختلفة للمحللين.
من ناحية أخرى ، هناك وظائف في مختبرات الاختبار الداخلية ، غالبًا في مجموعات عمل صغيرة ، والتي يتم دمجها في المفهوم العام للشركة.
هناك أيضًا وظائف في المختبرات الكبيرة التي ، بصفتها مقدمي خدمات خارجيين ، تقوم بإجراء تحليلات للسلطات والشركات دون وجود مختبر خاص بها. يتكون جزء كبير من القوى العاملة هنا من عمال المختبرات.
تبحث المختبرات في وحدات البحث في الجامعات وفي المرافق غير الجامعية عن محللين للتطوير والبحث.


اللوني

اللوني على التوالى. اللوني (اليونانية ، الألمانية الكتابة الملونة) في الكيمياء ، تسمى العملية التي تسمح بفصل خليط من المواد من خلال التوزيع المختلف لمكوناته الفردية بين الطور الثابت والمتحرك. تم وصف هذا المبدأ لأول مرة في عام 1901 من قبل عالم النبات الروسي ميخائيل س. تسويت ، وفي عام 1903 تم وصفه علنًا لأول مرة ، وفي عام 1906 استخدم مصطلح "كروماتوغرافيا" لأول مرة. قام بفحص المستخلصات النباتية الملونة ، على سبيل المثال من مادة الأوراق ، وتمكن من عزل الأصباغ المختلفة عنها عن طريق الكروماتوغرافيا. تُستخدم هذه الطريقة عمليًا ، من ناحية ، في الإنتاج لعزل أو تنقية المواد (= اللوني التحضيري) ومن ناحية أخرى ، في التحليل الكيميائي لفصل مخاليط المواد إلى مكونات تكون موحدة قدر الإمكان من أجل الغرض من التحديد أو التحديد الكمي. أصبح الكروماتوغرافيا جزءًا لا يتجزأ من الكيمياء العضوية والكيمياء الحيوية والتكنولوجيا الحيوية وعلم الأحياء الدقيقة وكيمياء الطعام والكيمياء البيئية وأيضًا الكيمياء غير العضوية.

مزيد من المعرفة المتخصصة الموصى بها

8 خطوات لميزان نظيف - و 5 حلول لإبقائه نظيفًا

لا تدع الكهرباء الساكنة تؤثر على دقة الوزن.

ما هي حساسية الميزان الخاص بي؟


إلومينا

نعم ، المتعة ليست رخيصة ، لكن الركائز رخيصة دائمًا في e-bay. سأبقي يدي بعيدًا عن الأيدي المستعملة ، لأنك لا تعرف أبدًا أي نوع من Schlonz كانوا يركضون هناك.

مساهمة بواسطة مشتق الكومارين & raquo الثلاثاء 13 سبتمبر 2016 الساعة 1:48 مساءً

في المدرسة ، استخدمنا دائمًا حقنة ميكروليتر للحقن في حلقة العينة.
لذلك مع 100 في حلقة العينة 20.

الكيمياء مثل الطبخ - فقط لا تلعق الملعقة!

لا تقل أنه لن ينجح حتى تحاول!

مساهمة بواسطة R'-MgX & raquo الأربعاء 14 سبتمبر 2016 الساعة 12:16 مساءً

مساهمة بواسطة مشتق الكومارين & raquo الأربعاء 14 سبتمبر 2016 الساعة 12:46 مساءً

حسنًا ، بالطبع هذا منطقي.

وأين تحصل على كانيولا غير حادة للحقن؟
لأنه مع العادي يمكنك كسر الختم!

الكيمياء مثل الطبخ - فقط لا تلعق الملعقة!

لا تقل أنه لن ينجح حتى تحاول!

مساهمة بواسطة R'-MgX & raquo الأربعاء 14 سبتمبر 2016 الساعة 1:45 بعد الظهر

مساهمة بواسطة مشتق الكومارين & raquo الخميس 15 سبتمبر 2016 الساعة 8:04 مساءً

لدي سؤال آخر حول صمام الحقن.
لا يحتوي الحاقن المدمج في HPLC (أعتقد 7010 من Rheodyne) على كابل لإشارة الحقن (فقط أولئك الذين لديهم حرف "i" في الجزء الخلفي من اسمهم لديهم). لكني أرغب في محاولة إرفاق ذلك به عبر جهة اتصال يتم إجراؤها عند الدوران. (ملاحظة: إنه صمام 7125!)

نشأ السؤال كيف يعمل هذا الجزء بالفعل. هل هناك جهد من وحدة التحكم وعندما يتم الاتصال ، هل يتدفق التيار؟

تحرير: بعد البحث في التعليمات الخاصة بوحدة التحكم وعلى الإنترنت ، أثبت تخميني أنه صحيح.
يُنصح أحيانًا بالبحث أولاً ثم الكتابة

على أي حال ، ها هي صورة بنائي:

الصفائح المعدنية عبارة عن صفائح رقيقة من النيكل تتميز بإمكانية لحامها جيدًا.
لقد قمت بطلاء الدعامة السفلية على "القدمين" بمادة PVC (مغمورة في THF-Sol) لعزلها ولصقها عليها.
يتم لصق الحامل العلوي بغشاء بلاستيكي كعازل ، ويتم لحام قوس التلامس بالقوس.
تؤدي الكابلات الملحومة إلى طرف الإدخال "ابدأ" لوحدة التحكم.

يبدو أن البناء مستقر تمامًا وعمل أيضًا بشكل رائع في الاختبار العملي الأول ، بدأ برنامج وحدة التحكم.
ليست أنيقة مثل صمام الدائرة المتكاملة ، بالطبع ، لكنها تؤدي المهمة!

الكيمياء مثل الطبخ - فقط لا تلعق الملعقة!

لا تقل أنه لن ينجح حتى تحاول!

مساهمة بواسطة مشتق الكومارين & raquo الخميس 15 سبتمبر 2016 الساعة 11:41 مساءً

أوه ، مع الاتصال عبر "PAN" يبدو سيئًا إلى حد ما.

قال موظف VWR أنه لم يعد لديهم أي معلومات حول اتصال الكمبيوتر أو البرنامج. ولم يكن أحد من شركة هيتاشي على اتصال حتى الآن.

سوف أتحقق مرة أخرى مع Hitachi ، وإلا فسوف آخذ البديل مع محول AD. ثم يمكنني اكتشاف طولين موجيين فقط من DAD ، وهو ما يتم باستخدام البرامج الحديثة.
وإذا كان لا يزال يتعين علي إيجاد طريقة للحصول على الأطياف ، فسيكون كل شيء أفضل ، ولكن بعد ذلك سيعمل النظام مرة واحدة على الأقل!

هناك أيضًا خيار تخزين ما يصل إلى 9 أطياف في الذاكرة الداخلية على DAD ثم إخراجها عبر مسجل.
إذا كان بإمكاني فعل شيء آخر ، فلن يكون لدي طيف ثلاثي الأبعاد ، ولكن على الأقل أطياف الأشعة فوق البنفسجية الفردية. حسنا دعنا نري.

تحرير: قد يكون من الممكن إخراج الأطياف كـ "شبه كروماتوجرافي" عن طريق بدء برنامج الكروماتوغرافيا ثم إخراج الطيف. بطريقة ما يجب أن يكون من الممكن قراءة الإشارة التناظرية للطيف في أي حال!

يمكن العثور على ما يلي في تعليمات التشغيل:

الكيمياء مثل الطبخ - فقط لا تلعق الملعقة!

لا تقل أنه لن ينجح حتى تحاول!

مساهمة بواسطة مشتق الكومارين & raquo الثلاثاء 27 سبتمبر 2016 ، الساعة 7:05 مساءً

إذن ، أخيرًا هناك أخبار جيدة!

لسبب واحد ، كنت في المدرسة اليوم لقياس عينتين في GC. لسوء الحظ ، لم يعمل GC - كان هناك حرفيون في غرفة القياس وتركوا في حالة من الفوضى (تم سحب المقابس ، وإلقاء الزجاجات الرائعة ، وكل شيء مليء بالأوساخ ، وجهاز كمبيوتر محطم في منتصف الطريق ،). لذلك لم أتمكن من القياس ، لكنني وجدت المزيد من التعليمات (لجهاز مراقبة الأشعة فوق البنفسجية ، الذي لم يكن لدي بعد ، وكذلك للمُدمج ، الذي لا أملكه) ، وقبل كل شيء ، مجموعة كاملة من قطع الغيار القطع!

تم تضمين الأجزاء التالية:
1 أداة لاستبدال الأختام
4 أختام لرأس المضخة
1 بانجو بولت (معدن)
1 مخروط مانع للتسرب (معدن)
الصمامات 1/2 أمبير (2x) ، 1 أمبير (4x) ، 2 أمبير (4x) ، 3 أمبير ، (2x)
1 حزمة مع اثنين من الكابلات الخضراء
1 كابل رمادي مسطح
1 غسالة صغيرة
2 صفائح معدنية صغيرة بفتحة
1 قنينة زجاجية بنية اللون بها سائل غير معروف
ملحقات صمام الحقن Rheodyne 7125 (حلزوني ، ربما "خلاط ملف" ، بالإضافة إلى أنبوب شعري فولاذي متعدد الزوايا مع برغيين مجوفين مع مخروط مانع للتسرب)
كابل مزود بجهاز استشعار واثنين من جهات الاتصال على شكل حرف U للاتصال
خرطوم تفلون مع لولب مجوف من البلاستيك وكتلة مستديرة ذات 4 فتحات


قم بتوسيع معرفتك العملية لتحليل البوليمرات

هل تحديد الوزن الجزيئي للبلاستيك جزء من عملك المخبري اليومي؟ في دليل التطبيق هذا ، تم تجميع العديد من الأمثلة التطبيقية لتحليل GPC / SEC للبوليمرات المختلفة. يمكن استخدام كروماتوغرافيا نفاذ الهلام (GPC) لتحديد الوزن الجزيئي النسبي للبوليمر من حجم الاحتفاظ.

يوفر GPC معلمات مهمة مثل متوسط ​​الأوزان الجزيئية Mn و Mw و Mz بالإضافة إلى توزيع الوزن الجزيئي (MWD). تحدد هذه الخصائص خصائص البلاستيك وبالتالي أيضًا مدى ملاءمتها لمجالات معينة من التطبيق. عادةً ما يتم إجراء تحليلات GPC / SEC في درجة حرارة الغرفة ، ولكن بعض المواد البلاستيكية ، مثل البولي أوليفينات طويلة السلسلة ، تتطلب درجات حرارة عالية لإحضارها إلى المحلول. يجب أن تظل درجة الحرارة مرتفعة بشكل مماثل أثناء التحليل بأكمله.

يحتوي كتاب تطبيقات GPC على العديد من الأمثلة التطبيقية لتحليل مجموعة متنوعة من البوليمرات في درجات حرارة الغرفة والعالية. سوف تتعلم كيفية تحليل فئات بوليمر معينة بشكل أكثر كفاءة ، وكيف يمكنك حفظ المذيبات وزيادة إنتاجية العينات ، وأي أعمدة GPC مناسبة لتطبيقاتك وما تحتاج إلى مراعاته عند تحليل البوليمرات ذات درجة الحرارة العالية.


هل نحن حقا بحاجة إلى اللوني؟

مع زيادة أداء أجهزة قياس الطيف الكتلي الحديثة (MS) ، تزداد أيضًا الحاجة إلى الكشف الحساس والمتزامن لعدد كبير من التحليلات في المصفوفات المعقدة. في ضوء هذه الخلفية ، يمكن اعتبار السؤال المطروح هنا بلاغيًا بحتًا ، لأن تأثيرات المصفوفة تؤدي إلى كبت أيون واضح وبالتالي تزيف بشدة نتائج التحليل [1].

أصل ومبدأ قياس الطيف الكتلي
منذ التجارب الأساسية الأولى التي أجراها السير جوزيف جون طومسون في عام 1897 (جائزة نوبل 1902) وتطوير أول مقياس طيف كتلة حقيقي (1912) من قبل طالب طومسون فرانسيس دبليو أستون (جائزة نوبل 1922) ، عدد كبير من أجهزة قياس الطيف الكتلي المختلفة ( على سبيل المثال MS رباعي الأضلاع ، MS وقت الرحلة ، MS المجال القطاعي ، مصيدة الأيونات ، المدار). لم يتغير الأساس المنطقي منذ مخطط طومسون الأول. أولاً ، يتم إنشاء الجسيمات أو الأيونات المشحونة في مصدر أيوني. يتم بعد ذلك فصل الأيونات في المحلل تحت فراغ وفقًا لنسبة الكتلة إلى الشحن (م / ض) قبل أن يتم اكتشافها بواسطة جهاز الكشف.

نظرًا لأن جميع تحقيقات قياس الطيف الكتلي تحدث في الطور الغازي ، كان من الواضح في البداية الجمع بين كروماتوجرافيا الغاز (GC) كطريقة فصل أولية مع قياس الطيف الكتلي. لم يحدث الاقتران بالكروماتوغرافيا السائلة (LC) إلا في وقت لاحق ، حيث كان لابد من حل المشكلة أولاً لفصل الشطف عن التحليلات دون خسائر ونقلها إلى الجزء عالي الفراغ من MS. مع واجهة الحزام المتحرك ، كان هذا ممكنًا في وقت مبكر ، ولكن نظرًا لمنطقة التطبيق المحدودة ونقص المتانة ، لم يعد هذا يلعب دورًا اليوم. تم تحقيق هذا الاختراق من خلال تطوير واجهات قوية تمكن من التأين تحت الضغط الجوي. يستحق عمل جون ب. فين ، الذي حصل على جائزة نوبل في عام 2002 لتطوير وتطبيق التأين بالرش الكهربائي (ESI) لتحديد الجزيئات البيولوجية الضخمة وتحليلها الهيكلي (أطلق عليها اسم "الفيل الطائر") ، تنويهًا خاصًا. حتى الآن ، يعد ESI أكثر واجهة LC-MS استخدامًا نظرًا لملاءمته الروتينية وقابليته للتطبيق لمجموعة واسعة جدًا من المواد. على عكس التأين الكيميائي عند الضغط الجوي (APCI) ، حيث يكون تبخر المذيبات والتأين منفصلين ، يحدث انحلال الطور المتحرك السائل والتبخر والتأين باستخدام ESI في عملية واحدة. تعمل المصادر الأحدث مثل APPI (التأين الضوئي للضغط الجوي) و APLI (التأين بالليزر للضغط الجوي) على توسيع نطاق تطبيقات MS. لذلك يمكن تسمية مقياس الطيف الكتلي بحق تقنية تحليل عالمية وانتقائية ، حيث يمكن تحليل الجزيئات القطبية وغير القطبية ، وكذلك الجزيئات الصغيرة والكبيرة (الكبيرة) بالاقتران مع فصل GC أو LC.

مفارقة تعدد الطرق
بينما احتوت الطرق المتعددة LC-MS الأولى قبل بضع سنوات على ما يصل إلى 10 مركبات فقط ، يمكن اليوم تسجيل أكثر من 100 مكون في عملية تحليل واحدة [2]. لذا فإن السؤال الذي يطرح نفسه هو دور الكروماتوغرافيا في طرق "الأهداف المتعددة". يوضح قسم كروماتوجرافي لفصل معيار مبيد الآفات باستخدام اقتران UHPLC-TOF الموضح في الشكل 1 بوضوح أنه لا يمكن فصل جميع التحليلات المكتشفة كروماتوغرافيًا عن طريق تغيير انتقائية نظام الطور. لن يكون الفصل الكروماتوغرافي الكامل ممكنًا إلا فيما يتعلق بتقنيات الفصل ثنائي الأبعاد ، مثل على سبيل المثال B. LC-LC مقطوع القلب أو LC x LC الشامل الممكن [3].

مطياف الكتلة وقت الرحلة و MS رباعي الأضلاع
في حين أن محللات TOF غالبًا ما تستخدم لفحص التجارب أو في مجال التحليل غير المستهدف ، فإن الأنظمة الرباعية الثلاثية هي "أحصنة العمل" للتقدير الكمي في النطاق الأدنى نانوغرام / لتر في تحليل الهدف [4]. في معظم الحالات ، يُطلق على وضع القياس ما يسمى بمراقبة التفاعل المتعدد (MRM) ، حيث يتم قياس تحولات جماعية محددة على الأقل لكل تحليل. توفر الأجهزة الحديثة إمكانية تكييف عدد الانتقالات الجماعية مع وقت الاستبقاء (مجدول أو مستهدف أو موقوت MRM). مع الأجهزة القديمة التي لا تحتوي على مثل هذا الخيار ، ولكنها لا تزال موجودة في العديد من المختبرات الروتينية ، يجب تسجيل جميع التحولات الجماعية على مدار الكروماتوغرافي بأكمله. يمكن رؤية حدود هذا النهج في الشكل 2. هنا تم الكشف عن 50 تحليلاً باستخدام MS رباعي الأضلاع بطريقة متعددة ، مع تسجيل نقل جماعي واحد فقط لكل تحليل. بينما يبلغ عرض الذروة حوالي 10 ثوانٍ بتركيزات أعلى ، يتم تقليله إلى بضع ثوانٍ بتركيزات منخفضة ، بحيث يتم إنشاء أقل بكثير من 10 نقاط بيانات لكل ذروة. إذا تم ضبط وقت استقرار مطياف الكتلة على أدنى قيمة محددة للجهاز ، فإن الضوضاء تزداد فقط (البيانات غير معروضة). في ظل هذه الخلفية ، يمكن فقط للأجهزة التي لديها تسجيل يعتمد على الوقت للانتقالات الجماعية أن تقيس في وقت واحد عددًا كبيرًا من المواد في عملية تحليل واحدة. يتمثل النهج البديل في زيادة وقت التدرج لتقليل عدد القمم التي يتم فصلها لكل وحدة زمنية بحيث يتم الحصول على 10 نقاط بيانات على الأقل لكل ذروة. ومع ذلك ، فإن هذا يزيد من وقت التحليل ، والذي بدوره له تأثير سلبي على إنتاجية العينة.

استخدام أعمدة متجانسة وميكرو LC كأداة أمامية
بالنسبة للفصل الموضح في الشكل 2 ، تم استخدام نظام micro-LC كأداة أمامية بعمود نانوي متآلف. يلعب نوع المرحلة الثابتة دورًا حاسمًا في تسريع عملية الفصل. تم إنشاء جزيئات أقل من 2 ميكرومتر مسامية بالكامل لعدد من السنوات. نظرًا لقطر الجسيمات الصغير ، يكون المصطلح C لمنحنى فان ديمتر أفقيًا تقريبًا. وبالتالي يمكن زيادة معدل التدفق حتى الوصول إلى أقصى ضغط للنظام أو عمود الفصل دون أي فقد في كفاءة الفصل. ومع ذلك ، في بعض الحالات ، يتم تحقيق ضغوط عالية جدًا بالفعل بمعدلات تدفق منخفضة ، خاصة عند استخدام الميثانول كمذيب مشترك عضوي. لذلك ، تشكل مراحل القشرة الأساسية بديلاً للجزيئات الفرعية المسامية تمامًا التي يبلغ طولها 2 ميكرومتر. يؤدي مسار الانتشار الأصغر في كثير من الحالات إلى أداء فصل مشابه مع ضغوط خلفية منخفضة. بديل آخر هو أعمدة الفصل المتجانسة. بسبب هيكل المسام الفريد ، ينتج عن ذلك ضغوط خلفية منخفضة للغاية ، بحيث يمكن تحقيق سرعات تدفق خطية عالية جدًا. نظرًا لأن القطر الداخلي للعمود يؤثر أيضًا على الضغط الكلي ، فإن أعمدة الفصل المتجانسة مفيدة بشكل خاص إذا تم استخدام أعمدة نانوية بقطر داخلي يصل إلى 100 ميكرومتر.

ومع ذلك ، فإن استخدام أعمدة الفصل ذات القطر الداخلي الصغير يجعل من الضروري استخدام أنظمة HPLC مُكيَّفة بشكل خاص مع نظام منخفض للغاية أو حجم ميت. مع وضع هذا في الاعتبار ، فإن أنظمة LC الشعرية أو الدقيقة هي الخيار الأول. Die Mikro-HPLC gewinnt in den letzten Jahren wieder an Bedeutung, da sie im Vergleich zu konventionellen (U)HPLC-Systemen zahlreiche Vorteile aufweist. Der Lösungsmittelverbrauch wird deutlich reduziert, wenn die Pumpen die mobile Phase im μl/min-Bereich fördern, ohne dass Flow-Splitter verwendet werden. Darüber hinaus können Volumina von 50 nl und weniger reproduzierbar injiziert werden, wenn nur eine begrenzte Probenmenge vorhanden ist. Allerdings gibt es seitens der Anwender immer noch viele Vorbehalte gegenüber der Mikro-LC, die deren Einsatz in Routinelaboratorien auf breiter Basis bis heute verhindert haben. Dies ist häufig der Tatsache geschuldet, dass Probleme bezüglich der Reproduzierbarkeit der Gradientenmischung bzw. der Flussrate beobachtet werden. Moderne Systeme sind jedoch in der Lage, die Flussrate ohne Split hochreproduzierbar zu fördern. Darüber hinaus verfügen diese Systeme über ein Gesamttotvolumen von weniger als einem Mikroliter. Selbst bei 100 aufeinanderfolgenden Gradientenläufen liegt die relative Standardabweichung für die einzelnen Läufe bei ca. 0,6 %, was als sehr gutes Ergebnis angesehen werden kann.

Der nächste Punkt betrifft das Gradientenverweilvolumen, das für das hier verwendete System zu 0,93 μl bestimmt wurde. Auch wenn die meisten Pumpen herkömmlicher UHPLC-Systeme für niedrige Flussraten bis 1 μl/min spezifiziert sind, ist es nicht möglich, mit diesen Systemen in diesem Flussbereich schnelle Zykluszeiten zu erreichen. Der Grund hierfür liegt darin, dass es zehn Minuten dauert (!) bis der Gradient die Säule erreicht, wenn die Flussrate auf 5 μl/ min eingestellt wird und das Verweilvolumen 50 μl beträgt. Im Gegensatz dazu beträgt die Gradientenverzögerung beim Mikro-LC-System nur 11,2 Sekunden.

Künftige Herausforderungen der LC-MS in der Umweltanalytik
Eine große Herausforderung für die LC-MS in der Umweltanalytik besteht in der sicheren Quantifizierung ausgewählter prioritärer Stoffe im Ultraspurenbereich. In 2012 erweiterte die EU die Europäische Wasserrahmenrichtlinie und schlug Umweltqualitätsnormen (UQN) vor. Neben der Aufnahme weiterer Schadstoffe wurden auch zwei hormonell aktive Substanzen, nämlich 17α-Ethinylestradiol (EE2) und 17β-Estradiol (E2) vorgeschlagen. Eine Aufnahme in die Liste der prioritären Stoffe erfolgte bisher nicht. Stattdessen sind EE2 und E2 in eine sogenannte Beobachtungliste („watch list“) aufgenommen worden (RL 2013/39 EU). Aufgrund der geringen Wirkungsdosis von Hormonen auf aquatische Systeme wurden als Umweltqualitätsnorm 0,035 ng/l für EE2 und 0,4 ng/l für E2 abgeleitet. Dies bedeutet, dass zur Erfüllung der genannten Anforderungen eine entsprechende Probenanreicherung verwendet werden muss. Eine Strategie könnte hier z. B. in der Direktinjektion großer Probevolumina auf die chromatographische Trennsäule und anschließender massenspektrometrischer Detektion bestehen. Abbildung 3 zeigt das resultierende Chromatogramm ausgewählter prioritärer Schadstoffe durch eine großvolumige Injektion auf eine SPE-Kartusche. Für die hier ausgewählten Stoffe ist es ohne weiteres möglich, eine Konzentration von 1 ng/l aus der Direktinjektion zu messen. Allerdings muss angemerkt werden, dass es sich hierbei um die Injektion einer Standardlösung handelt. Wird ein zusätzlicher Anreicherungsschritt von z. B. einem Liter über offline-SPE vorgenommen, muss das Clean-up optimiert werden, um störende Matrixkomponenten zu entfernen, die zu einer starken Ionensuppression führen können.

Neue Kopplungsstrategien
In den letzten 30 Jahren wurden auf den Gebieten der Flüssigkeitschromatographie und Massenspektrometrie große Fortschritte erzielt. Dies bedeutet, dass alternative Detektionsmethoden nicht innerhalb kurzer Zeit eine vergleichbare Leistungsfähigkeit wie die Massenspektrometrie erreichen können. Die Integration neuer und innovativer Detektionsverfahren ist jedoch immer dann sinnvoll, wenn zusätzliche spektroskopische Informationen erhalten werden können. Ein solches Verfahren ist die mit der Flüssigkeitschromatographie online gekoppelte Raman- Spektroskopie. Normalerweise wird die Raman-Spektroskopie nicht im Zusammenhang mit der Spurenstoffanalytik genannt. In den letzten Jahren hat die Verfügbarkeit leistungsstarker Systemkomponenten, wie z. B. verbesserter CCD-Kameras und Laser, zu einer deutlich größeren Anwendungsbreite der Raman-Spektroskopie in der Analytik geführt. In Abbildung 4 ist eine Detektionszelle auf Basis eines Flüssigkern-Lichtwellenleiters dargestellt, die wie eine UV-Zelle in den Fluss des HPLC-Eluats geschaltet wird. Die hier gezeigten Entwicklungsarbeiten beziehen sich auf ein Kooperationsprojekt, in dem die Hochtemperatur-HPLC mit der Raman- Detektion und Isotopenverhältnis-Massenspektrometrie gekoppelt wurde [5]. Mit Hilfe der Raman-Detektion können die getrennten Substanzen wie z. B. Steroide und Pharmazeutika eindeutig über ihr charakteristisches Raman-Spektrum identifiziert werden. Aufgrund der Tatsache, dass die Nachweisgrenze für viele Substanzen 500 μg/l beträgt, wird in einem aktuellen Forschungsprojekt die oberflächenverstärkte Raman-Spektroskopie (SERS, surface enhanced Raman scattering) genutzt, um die Nachweisgrenze zu verbessern. Bei erfolgreichem Projektverlauf stünde somit eine Technologie zur Verfügung, die für viele Labore eine kostengünstigere und einfachere Alternative zur Massenspektrometrie darstellt, wenn eine Identifizierung von Zielsubstanzen mittels UV-Detektion nicht möglich ist. Insbesondere bei den Steroiden ist die Ionisationseffizienz in der Massenspektrometrie so gering, dass die Detektion mittels Raman-Spektroskopie in einigen Jahren eine echte Alternative zur massenspektrometrischen Detektion sein könnte.

Für die oben genannte Kopplung zwischen Hochtemperatur-HPLC, Raman-Detektion und Isotopenverhältnis-Massenspektrometrie kann nur Wasser als mobile Phase verwendet werden. Wasser ist auch in Verbindung mit der Raman-Detektion ideal, da die Raman-Signale von Wasser keinen Störeinfluss auf die Signale der Analyten ausüben. Zur Erhöhung der Elutionskraft wird die Hochtemperatur- HPLC genutzt, die mittlerweile gut charakterisiert ist [6]. Im aktuellen Forschungsvorhaben wird jedoch auch der Einfluss von organischen Lösemitteln auf das Ausmaß der Raman- Streuung untersucht, da bislang noch nicht eindeutig geklärt ist, ob sich die mit SERS zu erwartenden Verstärkungseffekte auch auf das organische Lösemittel auswirken.

Quo vadis LC-MS?
Auch in den kommenden Jahren ist nicht mit einem Stillstand hinsichtlich der Weiterentwicklung immer selektiverer und empfindlicherer Geräte mit verbesserter Nachweisstärke zu rechnen. Ein Trend, der sich in den aktuellen Geräteentwicklungen abzeichnet, ist die Implementierung der Ionenmobilität, die einen zusätzlichen Trennschritt darstellt. Die Analyse immer komplexerer Proben, die zum Teil eine Vielzahl strukturähnlicher Verbindungen enthalten, macht eine weitere Steigerung der Selektivität des Massenspektrometers notwendig. Dies ist auch der Grund, warum viele Hersteller mittlerweile hochauflösende Hybridmassenspektrometer (Q-TOF, IT-TOF, QExactive etc.) entwickelt haben, die neben der Bestimmung der exakten Masse auch Fragmentierungsexperimente erlauben, um somit Rückschlüsse auf die Struktur isobarer Komponenten zu ziehen.

Darüber hinaus werden zweidimensionale chromatographische Trenntechniken in Zukunft eine immer größere Rolle spielen, wenn es um die Aufklärung komplexer Prozesse in der Abwasserreinigung, der Lebensmitteltechnik oder der Bioanalytik geht [7]. Neben einer entsprechenden Weiterentwicklung der Hardware ist auch die Software zur Steuerung und Auswertung ein wesentliches Element, um die „Benutzerfreundlichkeit“ weiter zu verbessern. In diesem Zusammenhang muss aber auch kritisch hinterfragt werden, ob die Qualifikation des Personals den Erfordernissen der Technologie entspricht. High-Tech-Geräte machen auch die Verfügbarkeit entsprechend geschulter Anwender erforderlich, wenn nicht Rauschen integriert werden soll. Leider ist zu beobachten, dass die Potenziale der LC-MS, die bereits heute zur Verfügung stehen, nur von einer sehr kleinen Anzahl an Experten überhaupt noch ausgeschöpft werden können. In Zukunft gilt es also auch diese Lücke zu schließen, damit die Technik nicht schlicht als „unbedienbar“ gilt. Den Ausbildungsstätten und Universitäten kommt hier eine besondere Rolle zu, die allerdings auch nur bei entsprechender finanzieller Ausstattung zu erfüllen ist.

Schlussfolgerung
Die mit der Flüssigkeitschromatographie gekoppelte Massenspektrometrie wird auch in Zukunft die Methode der Wahl bleiben, wenn es um die Bestimmung und Quantifizierung von Spurenstoffen geht. Ein vielversprechender Ansatz, Analysenzeiten zu beschleunigen und Ressourcen zu sparen, ist die Implementierung von Mikro-LC-Systemen und die Verwendung von monolithischen Trennsäulen. Um die Anforderungen aktuell diskutierter Umweltqualitätsnormen zu erfüllen, wird die Festphasenextraktion auch weiterhin unverzichtbarer Bestandteil des Analyseverfahrens bleiben. Aufgrund der sehr hohen Anwendungsbreite der LCMS in der Spurenstoffanalytik werden alternative Detektionstechniken wie z. B. die Raman- Spektroskopie in den nächsten Jahren nicht in der Lage sein, mit der Massenspektrometrie zu konkurrieren. Allerdings kann die Integration eines Raman-Detektors in ein System aus UV- und MS-Detektion ein wichtiges Werkzeug sein, um möglichst viele spektrale und spektroskopische Informationen aus komplexen Proben zu extrahieren, wenn eine Erfassung im Ultraspurenbereich nicht notwendig ist.

Danksagung
Das Forschungsvorhaben 17497 der Forschungsvereinigung der Arzneimittelhersteller (FAH) wird über die AiF im Rahmen des Programms zur Förderung der Industriellen Gemeinschaftsforschung und -entwicklung (IGF) vom Bundesministerium für Wirtschaft und Technologie aufgrund eines Beschlusses des Deutschen Bundestages gefördert.

Darüber hinaus möchten die Autoren Norbert Wenkel und Dr. Andreas Bruchmann von Axel Semrau für die Leihgabe des Systems Spark Holland Symbiosis Pico (online SPE-HPLC) danken. Außerdem bedanken sich die Autoren bei Dr. Karin Cabrera und Dr. Stephan Altmaier von Merck für die Leihgabe monolithischer Säulen.

Literatur
[1] Stahnke H. et al.: Anal. Chem. 81, 2185 (2009)
[2] Vishwanath V. et al.: Anal. Bioanal. Chem 395, 1355 (2009)
[3] Eeltink S. et al.: J. Chromatogr. A 1216, 7368 (2009)
[4] Zedda M. und Zwiener C.: Anal. Bioanal. Chem. 403, 2493-2502 (2012)
[5] Jochmann M.A. et al.: GIT Labor-Fachzeitschrift 54, 182-185 (2010)
[6] Teutenberg T.: High-Temperature Liquid Chromatography – A User’s Guide for Method Development, Royal Society of Chemistry, Cambridge, 2010
[7] Haun J. et al.: Anal. Chem. 85, 10083 (2013)

Zusatzinformation Abb. 3:
Konzentration: 1 ng / l, Anreicherungsvolumen: 10 ml, SPE-Kartusche: Spark Hysphere C18HD, HPLC-Säule: Phenomenex Kinetex 50 x 2,1 mm, 2,6 μm C18 100 Å.

Autoren
Dr. Thorsten Teutenberg, Leiter des Bereichs Forschungsanalytik
Juri Leonhardt, Doktorand, Bereich Forschungsanalytik
Terence Hetzel, Doktorand, Bereich Forschungsanalytik
Sandy-Dominic Freihoff, wissenschaftlicher Mitarbeiter, Bereich Forschungsanalytik
Dr. Jochen Türk, Leiter des Bereichs Umwelthygiene und Spurenstoffe
Institut für Energie- und Umwelttechnik e. V.

Prof. Dr. Hans Bettermann, Leiter der Arbeitsgruppe für Flüssigphasen- Laserspektroskopie, Institut für Physikalische Chemie
Björn Fischer, Doktorand, Institut für Physikalische Chemie
Heinrich-Heine-Universität Düsseldorf

Lebenslauf Dr. Thorsten Teutenberg

Dr. Thorsten Teutenberg hat Chemie an der Ruhr- Universität Bochum studiert. Er hat dort zum Thema „Hochtemperatur-HPLC“ am Lehrstuhl für Analytische Chemie promoviert.

2004 wechselte er an das Institut für Energie und Umwelttechnik e. V. in Duisburg als wissenschaftlicher Mitarbeiter.

Seit 2012 leitet er den Bereich Forschungsanalytik und beschäftigt sich vorwiegend mit allen Aspekten der Hochtemperatur-HPLC, miniaturisierten Trenn- und Detektionstechniken sowie multidimensionalen chromatografischen Verfahren.

Lebenslauf Dr. Jochen Türk

Dr. Jochen Türk absolvierte sein Chemiestudium an der TU Dortmund. Seit 2001 ist er wissenschaftlicher Mitarbeiter am Institut für Energieund Umwelttechnik e. V. (IUTA) und hat sich im Rahmen seiner Promotion an der Universität Duisburg-Essen mit der Entwicklung von LCMS/ MS Analyseverfahren in Arbeits- und Umweltschutz beschäftigt.

Von 2003 bis 2008 war er als Projekt- und Laborleiter im Bereich Umweltmedizin tätig. Als Bereichsleiter war er von 2009 bis 2011 für die Forschungsanalytik verantwortlich.

Seit 2012 leitet er den Bereich Umwelthygiene & Spurenstoffe und beschäftigt sich mit Biound Umgebungsmonitoring von Zytostatika. Der Schwerpunkt seiner Arbeit liegt bei der Spurenanalytik mittels LC-MS sowie der Entwicklung von oxidativen Abwasserbehandlungsverfahren. Dabei spielt insbesondere die chemisch- biologische Charakterisierung von Transformationsprodukten eine große Rolle.


Illumina

Angenommen ich kaufe mir ein bestimmtes Lösungsmittel, filtriere es durch einen Filter <0.5 Mikrometer Porengrösse. Kann dieses dann bedenkenlos als HPLC Eluent benutzt werden? Die Reinheitsansprüche sind in diesem Fall nicht allzu hoch, also minimale Mengen absorbierende Verunreinigungen können in Kauf genommen werden. Was sagt ihr? Hat jemand das schon gemacht oder sollte man ausschließlich HPLC grade Lösungsmittel kaufen?

Beitrag von Glaskocher » Donnerstag 30. August 2018, 11:35

Beitrag von Vanadium » Donnerstag 30. August 2018, 22:34

Beitrag von Reosir » Samstag 1. September 2018, 13:24

Als prinzipielle Gefahren sehe ich:
- Verunreinigungen aus dem LM, die sehr langsam wieder von der Säule runtergehen
- Verunreinigungen aus dem LM, die die Belegung der Säule angreifen (z.B. Spuren Alkali)
Das ist besonders dadurch etwas problematischer, da du den Eluenten ja in großer Menge im Verhältnis zur Säule einsetzt.

Nach meiner letzten Dreckige-HPLC-Spül-Erfahrung kann ich nur raten, den stärksten für die Säule vom Hersteller erlaubten Eluenten zu verwenden: Habe viele Stunden mit Acetonitril gespült gehabt - runtergekommen ist der Dreck von der C18 aber erst (dafür dann flott) mit Dichlormethan. Mit einem starken Eluenten solltest gar nicht zu viel Liter brauchen.
Als ich früher mal präparative HPLC für Doktoranden gemacht habe, habe ich zig Liter Synthese-Lösungsmittel (dürfte Toluol gewesen sein) dafür abrotiert. Die haben das schon Jahre so gemacht. Scheint also prinzipiell zumindest im präparativen Bereich möglich, qualitativ eher nicht so tolle Lösungsmittel zu nehmen. Kommt aber auch darauf an, was sonst noch mit der Säule getrennt werden soll.

Wenn du wirklich mit zig Litern spülen musst, könntest den Eluenten auch im Kreis fahren, so lange keine Absorption vorliegt. Bei schwer flüchtigem Zeug, das von der Säule eluiert werden soll, kannst auch den gebrauchten Eluenten destillieren, wenn du das hinkriegst, ohne Schlifffett oder ähnliche Verunreinigungen reinzukriegen.

Bei viel Dreck auf der Säule würde ich außerdem die Vorsäule wechseln, vor dem Spülen.

Um die HPLC-Anlage selbst musst dir im Gegensatz zur Säule weniger Gedanken machen: Da sind nur Partikel problematisch und wenn du filtrierst sollte das passen.


Einteilung nach den verwendeten Phasen

Aufgrund der mobilen Phasen kann man die Chromatographie in drei Gebiete unterteilen, welche sich nach den Trägern der stationären Phasen oder dem Aggregatzustand der stationären Phasen wieder in unterschiedlich viele Gruppen unterteilen lassen.

  • Flüssigchromatographie (engl. liquid Chromatography, LC)
    • Planare Chromatographie
      • Papierchromatographie – Als feste Phase wird Papier verwendet, das entweder liegt oder (meist) senkrecht in einem Glasbehälter steht. Wie auch bei der Dünnschichtchromatographie wird die mobile Phase auf Grund der Kapillarkräfte bewegt.
      • Dünnschichtchromatographie – Als feste Phase werden z. B. Silikapartikel in einer feinen Schicht auf einer flexiblen Trägerfolie aus Aluminium oder Plastik oder einer Glasplatte aufgetragen. Eine Variante ist die zirkuläre DC, mit einer rotierenden, beschichteten Kreisscheibe (speziell für präparative Zwecke geeignet).
      • Niederdruckchromatographie – Die hier verwendeten Säulen weisen Durchmesser von einem bis mehreren Zentimetern auf. Diese Form der Flüssigchromatographie wird vor allem für präparative Trennungen eingesetzt.
      • Hochleistungschromatographie (unrichtig, jedoch sehr gebräuchlich ist auch der Ausdruck Hochdruckchromatographie engl. HPLC High Performance (Pressure) Liquid Chromatography) – Sie stellt die heute am weitesten verbreitete in der Analytik eingesetzte Trennmethode dar, die eigentlich unkorrekte (veraltete) Bezeichnung High Pressure Liquid Chromatography bezieht sich auf die Drücke, die diese Methode von der Niederdruck- oder anderen Chromatographiearten unterscheidet. Immerhin werden hier bis über 1000 bar bei einer Flussrate der mobilen Phase bis zu 5 ml/min erzeugt, die jedoch mit der Trennleistung nicht zu tun haben, sondern nur zur Fortbewegung des Eluentengemischs in der Säule dienen.
      • Elektrochromatographie – In diesem Fall wird die Mobile Phase durch Anlegen einer Spannung bewegt. Diese Methode befindet sich noch im Entwicklungsstadium und wird im Routinebetrieb nicht angewendet. Nicht zu verwechseln mit Elektrophorese.
      • Hierbei wird statt einer mit chromatographischer Matrix gefüllten Säule eine ein- oder mehrlagige Membran als feste Phase in einem entsprechenden Gehäuse eingesetzt. Die mobile Phase wird bei niedrigen Drücken bis zu 6 bar und bei etwa 20-fach höheren Flussraten als in der Säulenchromatographie üblich durch die Membran gepumpt.
      • Gepackte Säulen – Das Innere einer Säule (lange Röhre) ist mit einem feinkörnigen Material gefüllt. In der Regel besteht dabei die stationäre Phase aus einem dünnen Film einer weitgehend inerten und hochsiedenden Flüssigkeit, der die Pulverkörner überzieht.
      • Kapillarsäulen – Nur die Säulenwand ist mit einer dünnen Schicht aus stationärer Phase bedeckt.
        • Flüssige stationäre Phase
        • Feste stationäre Phase

        Für eine reibungslose Laborroutine sind zuverlässige Ergebnisse und lange Standzeiten gefordert. Die neue (U)HPLC Serie Nexera LC-40 von Shimadzu kombiniert dies mit neuen intelligenten Funktionen. Die Nexera Serie unterstützt Sie aktiv bei HPLC-Messungen und vermeidet typische Fehlerquellen. Sie sparen Kosten und wertvolle Zeit mit Funktionen wie der automatischen Detektion von Luftblasen.

        Befinden sich während der Messung Luftblasen im System, ist die aktuelle Messung und alle folgenden hinfällig. Sie müssen das System Spülen und alle Messungen Wiederholen. Diesen Zeitaufwand erspart Ihnen die neue (U)HPLC Nexera Serie mit der Automatischen Erkennung von Luftblasen im System. Wird eine Luftblase erkannt, kann die Nexera Serie die aktuelle Messung stoppen, das System spülen und die Messung wiederholen oder überspringen. Sie sparen wertvolle Zeit und haben sichere Ergebnisse.

        Mit dem Mobile Phase Monitor überwachen Sie die Füllstände Ihrer Eluenten in Echtzeit. Befindet sich zu wenig Eluent vor dem Starten einer Sequenz in der Flasche gibt die Nexera Serie aktiv Rückmeldung. Der Start pausiert, bis Sie den Eluenten aufgefüllt haben. Sie sparen das Geld für die Neuanschaffung von trocken gelaufenen Säulen und sparen Zeit für zeitintensive Nachmessungen.

        Die Nexera Serie ist in Ausführungen bis 1300 Bar verfügbar und wird individuell für Ihre Bedürfnisse konfiguriert.


        Video: Chemistry Routes. HPLC. Part 2. مسارات الكيمياء. الكروماتوجرافيا السائلة عالية الأداء. الجزء 2 (ديسمبر 2021).